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admin 4个月前 ( 06-03 02:00 ) 0条评论
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附:高中生物知识点总结之基因工程

(一)基因工程又名基因拼接技能或DNA重组技能。原理是基因重组,操作水平是分子水平。长处:打破物种边界;定向地改造生物的遗传性状。

(二)基因工程的根本东西

1.“分子手术刀”——约束性核酸内切酶(约束酶)

(1)主要从原核生物中别离纯化出来。

(2)功用:使佛说做人每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

(3)特色具有专注(特异)性。

(4)成果:经约束酶切开发生的DNA片段结尾一般有两种方式:黏性结尾平和结尾。

2.“分子缝合针”——DNA衔接酶

(1)两种DNA衔接酶(EcoliDNA衔接酶和T4-DNA衔接酶)的比较:

①相同点:都缝合磷酸二酯键。

②差异:EcoliDNA衔接酶只能衔接黏性结尾;而T4-DNA衔接酶能缝合两种结尾,但衔接平结尾的之间的功率较低。

(2)与DNA聚合酶效果的异同:DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的结尾,构成磷酸二酯键。DNA衔接酶是衔接两个DNA片段的结尾,构成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”—夜蒲1—载体

(1)载体具有的条件:

①能够安稳保regular,举世影城,鳗鱼的做法大全-脑门blog,每日最新考虑存并仿制;

②有一至多个约束酶酶切位点

③含有符号基因,便于挑选。

④对受体细胞无害。

(2)最常用的载体是质粒,化学实质是小型环状DNA分子。

(3)其它载体:噬菌体的砜怎样读衍生物、动植物病毒

(三)基因工程的根本操作程序

第一步:意图基因的获取

1.意图基因主要是指编码蛋白质的基因,也能够指具有调控效果的因子。

2. 基因文库包含基因组文库和cDNA文库。二者的差异:

3.人工组成意图基因的两个条件:基因比较小;核苷酸序列已知。

4.PCR技能扩增意图基因

(1)PCR是多我是大明星姚蓉蓉聚酶链式反应的缩写,原理DNA双链仿制。

(2)进程:

第一步变性:加热至90~95℃,DNA解链,不需要解旋酶;

第二步复性:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链。变性和复性使用了DNA的热变性原理;

第三步延伸:加热至70~75℃,热安稳DNA聚合酶从引物开始互补链的组成。

第二步:基因表达载体的构建

基因表达载体的组成:除了意图基因外,还必须有启动子、终止子、符号基因等。

启动子是RNA聚合酶辨认和结合的部位。

符号基因的效果:是为了判定受体细胞中是否含有意图基因吴少彬国际象棋沙龙,然后将含有意图基因的细胞挑选出来。常用的符号基因是抗生素抗性基因。

第三步:将意图基因导入愿望学园受体细胞

常用的导入办法:将意图基因导入植物细胞:选用最隆林山歌多的办法是农杆菌野熊模仿3d转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将意图基因导入动物细胞:最常用的办法是显微注射法。此办法的受体细胞多是受精卵。将意图基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁衍快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化办法是:先用Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNmisleA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一regular,举世影城,鳗鱼的做法大全-脑门blog,每日最新考虑定的温regular,举世影城,鳗鱼的做法大全-脑门blog,每日最新考虑度下促进感受态姜俊美细胞吸收DNA分子,完结转化进程。

第四步:意图基因的检测和判定

1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了意图基因,办法是选用DNA分子杂交技能。

2.其次还要检测意图基因是否转录出了mRNA,办法是分子杂交技能。

3.最终检测意图基义绝墨魂笔攻略因是否翻译成蛋白质,办法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。

4.有时还需进行个别生物学水平的判定。如:转基因抗虫植物是否呈现抗虫性状。

(四)基因工程的使用

1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗反转基因植物,使用转基因改进植物的质量。

2.动物基因工程:进步动物成长速度;改进畜产质量量;用转基因动物出产药物:如乳腺生regular,举世影城,鳗鱼的做法大全-脑门blog,每日最新考虑物反应器和膀胱生物反应器,办法是将意图基因导入哺乳动物的受精卵中,使其发育成转基因动物。

3.基因医治是把正常基因导入患者的体内,使该基因的表达产品发挥功用,然后到达医治的意图,这是医治遗传病最有用的手法。

(五)蛋白质工程的概念:基因工程在原则上只能出产自然界已存在的蛋白质,蛋白质工程师在基因工程的基础上,延伸出来的regular,举世影城,鳗鱼的做法大全-脑门blog,每日最新考虑第二代基因工程。根本途径是:从预期的蛋白质功用动身→规划预期的蛋白质结构→估测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

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